مرجع
مرجع آنتیبیوتیک
مرجعی برای آنتیبیوتیکهای گزینش باکتری تراریخته: غلظت استوک و کاری، حلالی که در آن حل میشوند و نحوهٔ نگهداری. غلظتهای کاری مقادیر رایج برای E. coli است — همیشه با پلاسمید و سویهٔ خود تأیید کنید.
| آنتیبیوتیک | استوک | حلال | کاری (E. coli) | نگهداری | یادداشت |
|---|---|---|---|---|---|
| هیچ آنتیبیوتیکی با این جستوجو نمیخواند. | |||||
غلظتهای کاری مقادیر رایج برای گزینش E. coli است. غلظت درست به سویه، تعداد نسخهٔ پلاسمید، محیط و میزبان شما بستگی دارد — پیش از اتکا، آن را با نقشهٔ پلاسمید و اطلاعات سازنده تأیید کنید. غلظتهای گزینش پستانداری یا مخمری کاملاً متفاوتاند.
استوکها را با غلظت و حلالِ فهرستشده بسازید، استوکهای آبی را با فیلتر استریل کنید، تقسیم و منجمد نگه دارید. آنتیبیوتیک را تنها وقتی به محیط بیفزایید که تا زیر حدود ۵۵ درجهٔ سانتیگراد خنک شده باشد، چون گرما بیشتر اینها را تخریب میکند.
پرسشهای متداول
چرا مقاومت پلاسمید من با پلیت نمیخواند؟
آنتیبیوتیک باید با ژن مقاومتی که پلاسمید حمل میکند بخواند. نشانگر را در نقشهٔ پلاسمید ببینید، سپس پلیت متناظر را انتخاب کنید؛ پلاسمید کانامایسینی روی آمپیسیلین رشد نمیکند.
آیا آمپیسیلین را برای انکوباسیون طولانی بهکار ببرم؟
آمپیسیلین با بتالاکتامازی که سلولهای مقاوم ترشح میکنند تخریب میشود، پس پلیتهایی که خیلی میمانند کلنیهای اقماری گرد کلنیهای بزرگ میدهند. کاربنیسیلین پایدارتر است، یا کلنیها را بهموقع بردارید.
آیا این غلظتها برای سلولهای پستانداری درستاند؟
نه. اینها مقادیر گزینش باکتریاییاند. گزینش پستانداری از عوامل و غلظتهای متفاوت استفاده میکند که برای هر رده با منحنی کشتن تیتر میشود و خارج از دامنهٔ این جدول است.