Référence
Référence des antibiotiques
Une référence des antibiotiques servant à sélectionner les bactéries transformées : concentrations mère et de travail, solvant de dissolution et conservation. Les concentrations de travail sont les valeurs courantes pour E. coli — vérifiez toujours avec votre plasmide et votre souche.
| Antibiotique | Mère | Solvant | Travail (E. coli) | Conservation | Notes |
|---|---|---|---|---|---|
| Aucun antibiotique ne correspond à cette recherche. | |||||
Les concentrations de travail sont les valeurs couramment utilisées pour la sélection d’E. coli. La bonne concentration dépend de votre souche, du nombre de copies du plasmide, du milieu et de l’hôte — vérifiez avec votre carte de plasmide et le fournisseur avant de vous y fier. Les concentrations pour la sélection en cellules de mammifère ou de levure sont tout autres.
Préparez les solutions mères à la concentration indiquée dans le solvant indiqué, stérilisez par filtration les solutions aqueuses, répartissez en aliquotes et conservez congelé. N’ajoutez au milieu qu’après refroidissement en dessous d’environ 55 °C, car la chaleur détruit la plupart de ces antibiotiques.
Questions fréquentes
Pourquoi la résistance de mon plasmide ne correspond-elle pas à la boîte ?
L’antibiotique doit correspondre au gène de résistance porté par le plasmide. Vérifiez le marqueur sur la carte du plasmide puis choisissez la boîte adaptée ; un plasmide kanamycine ne poussera pas sur ampicilline.
Puis-je utiliser l’ampicilline pour une longue incubation ?
L’ampicilline est dégradée par la bêta-lactamase que sécrètent les cellules résistantes ; les boîtes laissées trop longtemps développent des colonies satellites autour des grosses. La carbénicilline est plus stable, ou prélevez les colonies rapidement.
Ces concentrations conviennent-elles aux cellules de mammifère ?
Non. Ce sont des valeurs de sélection bactérienne. La sélection en cellules de mammifère emploie d’autres agents et concentrations, titrés par lignée avec une courbe de mortalité, hors du cadre de cette table.