Клеточная культура
Пассаж и удвоения популяции
Отслеживает, насколько культура действительно выросла, а не сколько раз вы её рассевали. По числам посева и сбора даёт удвоения популяции, время удвоения и кумулятивный уровень удвоений; по соотношению пассажа оценивает удвоения, когда вы не считали.
Удвоения популяции — это log₂ кратности прироста от посева до сбора. Время удвоения — это время культуры, делённое на число удвоений. Кумулятивный PDL — это нарастающая сумма по пассажам и честная запись возраста линии; одно лишь соотношение пассажа таковой не является, ведь степень отрастания клеток перед сбором меняется.
По соотношению пассажа
Когда клетки рассевают в фиксированном соотношении и каждый раз доводят до той же плотности, удвоений на пассаж равно log₂ соотношения: пассаж 1:8 — это три удвоения. Так оценивают кумулятивные удвоения по соотношению и числу пассажей, когда точные числа посева и сбора не записаны.
Формула
удвоения популяции = log₂(сбор ÷ посев); время удвоения = время культуры ÷ удвоения
- посев
- клетки, высеянные в начале пассажа
- сбор
- клетки, полученные в конце
- кумулятивный PDL
- нарастающая сумма удвоений за жизнь линии
- по соотношению
- удвоений на пассаж = log₂(соотношение), при полном отрастании каждый раз
Разобранный пример
Посев 5 × 10⁵ и сбор 4 × 10⁶ через 72 часа
- посев 500 000
- сбор 4 000 000
- время 72 часа
- Кратность прироста: 4 000 000 на 500 000 — это 8.
- Удвоения: log₂ от 8 — это 3.
- Время удвоения: 72 часа на 3 — это 24 часа.
Ответ 3 удвоения, время удвоения 24 часа
Частые ошибки
- Записывать номер пассажа как меру возраста. Две лаборатории на пассаже 20 могут отстоять на десятки удвоений; кумулятивный PDL — это цифра, которая передаётся.
- Считывать время удвоения по двум сборам с разницей в дни. Рост в пассаже неравномерен; честную скорость даёт экспоненциальная фаза, а не плато.
- Смешивать часы и сутки. Вводите время культуры в одной единице и держите время удвоения в той же.
Частые вопросы
Соотношение пассажа или точный счёт?
Счёт лучше, ведь отрастание меняется. Путь соотношения — разумная оценка для отрезка истории, где вы записали лишь способ рассева.
Зачем нужен кумулятивный PDL?
Многие линии дрейфуют или стареют после определённого уровня удвоений. Учёт PDL позволяет списывать линию в заданном возрасте и делает работу воспроизводимой.
Что если сбор ниже посева?
Тогда чистого роста нет и времени удвоения не существует; ищите проблему высева или жизнеспособности, а не выжимайте число.